Identification de gènes exprimés dans la cochlée. Clonage de l'ADNc et caractérisation de SG6, une nouvelle protéine des neurones auditifs primaires
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
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Abstract FR:
L'approche de sequencage systematique a ete utilisee a partir d'une banque d'adnc de cochlee de rat pour identifier des genes importants pour le fonctionnement cochleaire. Une selection rigoureuse nous permettant de reconnaitre les clones dont l'expression tissulaire etait restrainte a ete ensuite effectuee par rt-pcr. Parmi les nouvelles sequences, nous avons isole un clone, pco8, exprime preferentiellement dans la cochlee. Une analyse extensive en hybridation in situ en utilisant des ribosondes marquees a la dioxygenine, dans la cochlee, ainsi que dans d'autres tissus du systeme nerveux central et peripherique a montre que son expression etait restreinte aux neurones auditifs primaires du ganglion spiral ainsi qu'a des motoneurones de la moelle epiniere. La sequence complete de l'arnm contient une phase ouverte de lecture unique qui code pour une proteine, nommee sg6, de 89 acides amines, d'un poids moleculaire calcule de 7,8 kda et ayant un point isoelectrique a 4,52. La proteine ne presente pas d'homologies significatives avec d'autres proteines ou familles de proteines connues. Elle presente a son extremite n-terminale un peptide signal de 21 acides amines et son profil d'hybrophobicite est majoritairement hydrophile ; ce qui implique qu'elle pourrait etre secretee. Nos resultats immunohistochimiques utilisant des anticorps polyclonaux anti-sg6 montrent que la proteine est localisee dans la lame spirale osseuse ; ce qui suggere que sg6 pourrait etre transportee apres sa synthese. La localisation restreinte de sg6 dans les neurones cochleaires et les motoneurones de la moelle epiniere ainsi que son absence d'homologie avec d'autres proteines connues encouragent a initier des recherches concernant sa fonction et sa localisation chromosomique