Croissance cristalline de protéines : méthodologie expérimentale
Institution:
Aix-Marseille 3Disciplines:
Directors:
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Dans le but d'obtenir de bons cristaux de proteines, nous avons mis au point plusieurs appareillages originaux destines a controler les deux etapes fondamentales de la cristallogenese que sont la germination et la croissance des cristaux. Parallelement, des informations utiles a la comprehension des mecanismes de croissance ont ete tirees des diagrammes d'equilibre et des cinetiques de croissance des cristaux. Les experiences de diffusion de la lumiere et des rayons x aux petits angles ont permis d'obtenir les rayons hydrodynamiques, les rayons de giration, les interactions et/ou la dispersion en taille des diffuseurs en solution. Nous avons decrit les resultats marquants obtenus sur nos proteines modeles: (i) l'amylase pancreatique de porc: taille du monomere, interactions, effet des sels, cinetiques de croissance, (ii) la parvalbumine mineure de brochet: croissance controlee de gros monocristaux et polymorphisme, (iii) ornithines carbamoyltransferases bacteriennes: changement conformationnel du a la transition allosterique, taille des oligomeres et polydispersite