Abstract FR:

Ce travail consiste en une étude préliminaire sur la production des petits peptides à partir des protéines de colza et se partage en trois parties: l'hydrolyse enzymatique des protéines de colza, les séparation et caractérisation des hydrolysats et, enfin, l'identification de la composition de petits peptides. L'intérêt de l'hydrolyse enzymatique réside dans la diversité des applications potentielles (cosmétique, pharmaceutique et alimentaire) des peptides obtenus. La première partie décrit l'obtention et la caractérisation de deux substrats protéiques (tourteau et concentrat) pour l'hydrolyse enzymatique. L'influence de quelques paramètres majeurs sur l'hydrolyse enzymatique comme la nature du substrat et de l'enzyme utilisée (Alcalase® 2. 4L, PTN® 3. 0S ou Orientase® 90N) est abordée. L'Alcalase® 2. 4L et l'Orientase® 90N conduisent à de très bons rendements en petits peptides. Dans une seconde partie, le fractionnement des hydrolysats par deux techniques complémentaires de séparation par la taille des molécules est abordé: l'ultrafiltration et la chromatographie liquide d'exclusion de taille à basse pression. Une cascade de séparations (ultrafiltration et C. L. -E. T. ) a conduit à l'obtention de fractions ciblées de petits peptides composés de deux à six acides aminés. Enfin, une nouvelle approche pour l'identification des petits peptides, utilisant le couplage C. L. H. P. /S. M. , est décrite. Le noyau de cette démarche est de combiner deux informations, la masse du peptide isolé et son temps de rétention en fonction de son caractère hydrophobe, afin de déterminer la composition des peptides en acides aminés. Cette méthode présente un intérêt pour la maîtrise des différentes étapes d'obtention de petits peptides et la recherche propriétés biologiques potentielles.