Abstract FR:

Le but de ce travail est l'analyse des potentialites de purification preparative de macromolecules biologiques par electrophorese de zone en ecoulement continu. Une premiere etude experimentale concerne l'influence des parametres operatoires sur les performances de la separation, evaluees a la fois en termes de resolution et de productivite grace a deux grandeurs caracteristiques. Le cas considere est celui d'un melange artificiel de deux proteines du lactoserum de proprietes connues. Un modele de transport simplifie, dont les hypotheses sont verifiees, est utilise pour relier les variations de performances aux phenomenes physiques mis en jeu. Le phenomene preponderant est lie a l'hydrodynamique de l'ecoulement du filet d'echantillon. Il conditionne la valeur du rapport du rayon du filet sur la demi-epaisseur de la chambre de separation, qui determine la resolution maximale de la separation. Il conditionne aussi la productivite de la separation, qui cependant augmente avec la quantite injectee, pour une purete donnee. Une etude experimentale, dans des conditions operatoires optimisees, associee a un calcul des performances permet d'identifier une limite du procede en ce qui concerne la productivite, qui ne depend, pour une separation donnee, que de la purete requise pour l'espece a purifier. Pour depasser cette limite, deux methodes sont proposees qui ne considerent plus le procede en tant qu'operation unitaire. Les performances de ces purifications en plusieurs etapes de separation associees a des etapes de concentration sont evaluees par le calcul ou par l'experience, et comparees. La plus grande flexibilite d'une purification multi-etagee explique sa superiorite sur une purification mono-etagee avec recyclage et soutirage