Elaboration et caractérisation d'une nouvelle membrane hybride à base d'alumine et de chitosane pour la purification des protéines par chromatographie d'affinité
Institution:
Montpellier 2Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
This work deals with the elaboration and the characterization of a hybrid chitosan/α-alumina with the aim of performing the purification of proteins by metal-affinity chromatography. The affinity membrane is elaborated by chitosane coating of a ceramic membrane, chemical modification of the polymer (cross-linking with epichlorohydrin and iminodiacetic acid grafting) and copper adsorption. In the first stage of this study, the chemical modification of chitosan was set up and validated thanks to experiments realised on chitosan films. After that, chitosane/α-alumine hybrid membranes were elaborated and characterized. Bovin Serum Albumin retention tests were carried out; the results obtained show that specific and non specific interactions took place. Even if the protein retention capacity was potentially attractive, it remains too low to replace commercial chromatographic columns
Abstract FR:
Cette étude porte sur l'élaboration et la caractérisation d'une membrane hybride chitosane/α-alumine en vue de son utilisation pour la purification de protéines par chromatographie d'affinité métallique. Le protocole d'élaboration comprend 3 étapes : la mise en place d'un dépôt de chitosane sur un support céramique tubulaire en alumine puis la modification chimique de ce dépôt (réticulation du polymère à l'aide d'épichlorohydrine et greffage d'acide iminodiacétique) et enfin la saturation de ce dernier par adsorption de Cu2+. Dans un premier temps, le protocole de modification chimique du chitosane a été validé au cours d'essais réalisés sur des films de polymère. Par la suite, des membranes chitosane/α-alumine ont été élaborées et caractérisées. Des tests de rétention d'albumine de sérum bovin (protéine modèle) ont permis de mettre en évidence la mise en place d'interactions spécifiques et non spécifiques entre la membrane et la protéine. Les capacités de rétention en protéines des membranes, quoique prometteuses, s'avèrent encore trop faibles pour que les membranes hybrides à base de chitosane puissent concurrencer les colonnes de chromatographie commerciales