Abstract FR:

Les capteurs amperometriques constituent une voie seduisante de dosage de substrats dans le controle des procedes de fermentation, de culture cellulaire, ou encore dans les domaines de l'agro-alimentaire ou de la medecine. Ces capteurs associent une partie biologique sensible, constituee d'une ou plusieurs enzymes, au transducteur physique qu'est l'electrode. Plusieurs voies de confinement des enzymes pres de l'electrode ont ete explorees, reposant sur une demarche physico-chimique. Deux capteurs bienzymatiques, avec les enzymes confinees pres de l'electrode par une membrane de cellophane, ont ete mis au point, l'un selectif de l'ion d-lactate, l'autre de l'ion l-glutamate. Les deux enzymes utilisees sont, pour le premier, une d-lactate deshydrogenase et une diaphorase, et pour le second, une l-glutamate deshydrogenase et une diaphorase. La gamme de linearite en substrat accessible s'etend, dans les deux cas, de quelques dizaines de micromolaires a quelques millimolaires. Dans le cas du capteur selectif de l'ion l-glutamate, l'association d'une troisieme enzyme, une glutamate oxaloacetate transaminase, permet d'exploiter le phenomene d'amplification enzymatique, et d'abaisser le seuil de detection d'un facteur cinq environ. Ces capteurs permettent d'effectuer des dosages, sur une periode d'un mois. La deuxieme consequence de ce travail est l'amelioration des performances du capteur specifique de l'ion l-lactate utilisant une l-lactate deshydrogenase de levure fixee sur une membrane polymerique preactivee. La stabilite operationnelle est dans ce cas de l'ordre de quatre mois, et le seuil de detection est abaisse d'un facteur cent, permettant la detection de concentration de l-lactate egale a quelques micromolaires