Abstract FR:

L'analyse par chromatographie d'exclusion sterique d'amidon natif ou mis en uvre suppose la solubilisation complete des echantillons. Pour pouvoir analyser en routine des produits amylaces, la mise en solution doit etre efficace et rapide, donc sans pretraitement. Le solvant choisi est le dmso dans lequel l'amidon forme des solutions stables. La solubilisation complete est obtenue par un premier chauffage a 100\c pendant une heure suivi d'un second a 170\c pendant 10 minutes. La mise au point de conditions d'elution a ete effectuee sur des systemes chromatographiques differents. Le premier comprend une nouvelle colonne divinylbenzene greffee glucose, de 25 cm permettant des analyses rapides. L'eluant qui permet une elution complete des produits amylaces est le dmso additionne d'un sel. On constate cependant la presence d'interactions secondaires. L'exclusion sterique n'est donc pas le seul processus d'elution des macromolecules. Les decalages des volumes d'elution sont tres sensibles a la nature des sels presents dans l'eluant, et sont nettement plus importants pour les composes de faible masse. Ils peuvent etre attribues a un phenomene de repulsion electrostatique entre les chaines et le gel de la colonne. Une methode originale d'etalonnage des colonnes a partir de chromatogrammes d'etalons secondaires de distribution des masses molaires large a ete mise au point. Le logiciel permet de minimiser les ecarts entre masses moyennes experimentales et calculees. Ce type d'etalonnage permet d'estimer de maniere plus realiste que l'etalonnage classique les masses molaires moyennes des echantillons au voisinage des fortes masses. La comparaison facile et rapide des distributions des masses molaires des amidons mis en uvre peut permettre l'estimation de la degradation des chaines macromoleculaires pendant leur transformation. Le second systeme chromatographique est constitue de deux colonnes de matrice polyether hydroxyle utilisables en milieu aqueux. Au detecteur de concentration est couple un nouveau detecteur de diffusion de la lumiere. L'eluant choisi est le nitrate de sodium a 0,1 mol/l dans l'eau. Les produits amylaces sont toujours solubilises dans le dmso. Cette chaine chromatographique nous permet de connaitre les masses molaires moyennes en poids absolues et le rayon de giration des echantillons.